光电比色计采用滤光片获得单色光,因为滤光片性能较差,只能得到近似的单色光,因而影响了光电比色计的灵敏度与准确度。

而采用分光光度法,又同时提高仪器的灵敏度。

有的仪器又同时用特制的光电管代替光电池,则又扩大了使用的光谱区范围。

分光光度法是通过分光系统(又称色散系统)将复合光渡分成一系列波长的单色光；

其中某一波长的单色光,可根据被测物质对某一渡长光渡的吸收强弱来选取。

分光光度计的分光系统又称单色器,通常是采用援镜将复合光分成单色光;其它部分的的造与光电比色计基本相同。

(1)分类

(2)基本工作原理

分光光度法的定量关系也可用朗伯一比尔定律表示。

分光光度法比光电比色法的灵敏度高,其灵敏度的表示方法有两种二摩尔吸光系数e和禁德尔(SandeJ1)灵敏度S(又称为灵敏度指数9)。

根据朗伯一比尔定律(式7-4)可知,大多数显色反应的摩尔吸光系数为10~105,该值越大,表示该显色反应灵敏度越高。

分光光度计的构造与使用

以721型分光光度计0为例介绍其构造与使用。

721型分光光度计適用手在可见光谱区的范围360~800nm内进行定量比色分析用。

仪器在410~710nm之间可增加消光片或采用有色溶液作被测溶液的陪衬代替空自,以便提高分析灵敏度和提高消光读数范围。